布鲁氏菌竞争ELISA诊断试剂盒

   布鲁氏菌竞争ELISA诊断试剂盒 用于检测牛、羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体。

  通用名:布鲁氏菌cELISA抗体检测试剂盒

主要成分及含量

组分

数量

抗原包被板

1块(或2块或5块或10块)(96孔/块)

单克隆抗体4C3

1管(120μl/管或240μl/管或600μl/管或1200μl/管)

阳性对照血清

1管(20μl/管或40μl/管或100μl/管或200μl/管)

阴性对照血清

1管(20μl/管或40μl/管或100μl/管或200μl/管)

羊抗鼠酶标抗体

1管(75μl/管或150μl/管或375μl/管或750μl/管)

羊抗鼠酶标抗体稀释液

1瓶(15ml/瓶或30ml/瓶或75ml/瓶或150ml/瓶)

样品稀释液

1瓶(30ml/瓶或60ml/瓶或150ml/瓶或300ml/瓶)

20×洗涤液

1瓶(15ml/瓶或30ml/瓶或75ml/瓶或150ml/瓶)

底物显色液

底物A:1瓶(6ml/瓶或12ml/瓶或30ml/瓶或60ml/瓶)

底物B:1瓶(6ml/瓶或12ml/瓶或30ml/瓶或60ml/瓶)

终止液

1瓶(12ml/瓶或24ml/瓶或60ml/瓶或120ml/瓶)

血清稀释板

1块或2块或5块或10块

作用与用途】  用于检测牛、羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体。

用法与判定

1  用法

1.1  样品处理  取动物全血,待血液凝固后,以4000r/min离心10分钟,收集上清,血清应清亮,无溶血。

1.2  1×洗涤液的配制  使用前,将20×洗涤液恢复至室温(20~25℃),并摇动,使结晶溶解(可在37℃水浴中加热5~10分钟),然后用去离子水作1:20稀释,充分混匀。

1.3  待检血清和对照血清的稀释  在血清稀释板中将待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清用样品稀释液作1:20稀释。

1.4  单克隆抗体的稀释   用样品稀释液按1:50稀释,充分混匀。

1.5  操作步骤

1.5.1  加样  取抗原包被板(根据样品多少,可拆开分次使用),以1×洗涤液300μl/孔洗板1次,弃去洗涤液。将稀释好的待检血清、阳性对照血清和阴性对照血清分别加入到ELISA板中,50μl/孔,其中阳性对照血清和阴性对照血清各加2孔(孔1、孔2)。加样结束后, 加入已稀释好的单克隆抗体,每孔50μl,振荡混匀5分钟。37℃作用30分钟后取出反应板,弃去反应液,每孔加入300μl 1×洗涤液,洗涤3次后甩干。

1.5.2  加酶标抗体  将羊抗鼠酶标抗体用羊抗鼠酶标抗体稀释液作1:100稀释后,每孔加入100μl,37℃作用30分钟。按1.5.1中的方法洗涤3次,甩干。

1.5.3  显色与终止  将底物溶液A和B按1:1(V/V)混合后,立即加入到ELISA反应板中,100μl/孔,室温避光显色15分钟后,每孔加50µl终止液终止反应。

2  结果判定  反应终止后,15分钟内用酶标仪测定OD450nm值。

2.1  计算公式

抑制率(PI)=(阴性对照OD450nm—检测样品OD450nm)/阴性对照OD450nm×100%。

2.2  试验成立条件

2个阴性对照血清重复测定孔的平均OD450nm应≥2.0;2个阳性对照血清重复测定孔的平均OD450nm应<0.2,且PI平均值应≥90%时,试验成立。

2.3  结果判定

当血清样本的PI≥30%时,为布鲁氏菌抗体阳性;

当血清样本的PI<30%时,为布鲁氏菌抗体阴性。

注意事项

(1) 本试剂盒仅供体外检测使用。

(2) 严格按照说明书操作,不同批号组分不得混用。

(3) 所有试剂一律于2~8℃保存,使用前应在室温平衡15~30分钟后方可使用,抗原包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

(4) 血清稀释板只能使用1次,未用完的血清稀释板应将用过的孔充分洗涤拍干,并进行标记,避免下次检测时发生混淆。

(5) 加样时应尽量避免起泡及液体溅出,避免样本间相互污染。

(6) 底物溶液应避光保存,避免与氧化剂接触,盛装底物溶液的容器应保持干净。

(7) 终止液为1M的HCL溶液,具有腐蚀作用,避免接触眼睛和皮肤。

贮藏与保存期】  2~8℃保存,有效期为12个月。

规格】  (1)96孔/盒 (2)192孔/盒 (3)480孔/盒 (4)960孔/盒

 仅供兽医诊断使用

 

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